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23.(12分)传统的木薯乙醇发酵工艺所使用的普通酿酒酵母缺乏水獬淀粉的酶系,需要经过蒸煮、液化、糖化等工序将木薯中的淀粉水解成葡萄糖后才能用于酵母菌发酵。为了提高制备乙醇的效率,研究者欲通过基因工程获得能够高效表达和分泌淀粉酶的重组酿酒酵母。请回答下列问题:(I)若要利用从细菌中获得的含淀粉酶基因((amy)的DNA片段为模板,则通过PCR技术获得大量amy时,还需要在缓冲液中添加引物、4种脱氧核苷酸、、镁离子等,需要添加引物的原因是扩增轮后能得到含目的基因的等长的DNA双链序列。(2)研究发现,如果ay上特定位置的GTG(位置如图1)突变为ATG,淀粉酶的活性将大大提高。为了通过PCR引人该定点突变,获得高效的淀粉酶,需要如何设计PCR引物?·5'GTG引物2·33一%-5引物1amy基因图1(3)用限制酶BamH I与SpeI切割含amy的DNA片段和载体pScIKP,然后将amy与载体相连接,构建重组质粒pSc-amy。对pScIKP和目的基因采用双酶切的目的是(4)已知淀粉遇碘变蓝,而葡萄糖遇碘无此现象。为了分离出能够高效表达淀粉酶基因的重组酵母,可使用含的培养基。培养3天后,用碘熏蒸染色,结果如图2所示。若你是研究者,将选择菌落(填数字)进行扩大培养,原因是图2生物学试题第8页(共8页)▣紫▣Q夸克扫描王极速扫描,就是高效
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